如何冷冻保存未受精卵?
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根据有关文献报道,经冷冻保存的未受精人卵已有若干例成功受孕。与冷冻胚胎相比,未受精人卵的冷冻成功率很低。然而在临床上未受精卵的应用与冷冻胚胎相比,想必是一个更佳的选择。目前对于接触冷冻保护剂并经冻融的卵子,担心其受精后形成的胚胎会增加染色体异常的危险性。
在理论上这种担心起源于以下事实:排卵前期的卵子是在第二次减数分裂的中期形成的,所以染色体仍附着减数分裂的纺锤体。一般认为纺锤体对温度甚为敏感。故在这种情况下卵子被冷却时有被极化可能,当发生受精时会干扰姐妹染色单体的分离。这种极化作用在排出第二极体后可导致染色体不分离,并产生非整倍染色体。据报道应用小鼠卵子进行的实验中经冻 /融的卵子,其多倍体发生率增加,但是非整体发生程度与新鲜卵子相同。经冻 /融的卵子受精后形成的胚胎,移植到假孕小鼠后与未冷冻卵子相比,其正常发育的比例相同。
有关冷冻保存未受精卵的标准方法学尚未被认可。冷冻保存人卵,通常用 DMSO,但其冻 /融速度各家报道不一。首例人卵冷冻后成功受孕者是用 1.5mol/L 的 DMSO 将卵子缓慢冷却到 -36℃ ,然后快速融解所致。Dietrich等报道的方法与上述相似,也是用 DMSO,缓慢冷却到 -30℃ ,然后快速融解。Trounson等的方法系使用 3mol/L 的 DMSO 和蔗糖作为冷冻液,2~ 6min后快速冷冻及融解。使用超速冷冻技术至今还没有很成熟的经验。
透明化可能会提供一种更好的卵子保存方法。但是该技术用于人卵保存的临床经验有限,有待进一步完善。分析用冷冻人卵而获妊娠成功的 5个病例数据,其经验有局限性,最佳方法还有待确认。将来超速冷冻的应用和(或)透明化程序的改进可能会使卵子保存技术用于临床实践。对于面临丧失卵巢功能的年轻女性或因年龄关系希望在丧失受孕能力前保存卵子的女性,这是一个有效的保存生育能力的方法
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