治疗眼眶横纹肌肉瘤有了新的突破
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手术切除为主治疗眼眶横纹肌肉瘤
肿瘤发生于眼眶内任何部位,最多见于眼眶鼻上部,也可以以可触及的结膜下或眼睑结节存在,同时伴有眼睑或球结膜水肿。肿瘤发生于眼眶内任何部位,最多见于眼眶鼻上部,也可以以可触及的结膜下或眼睑结节存在,同时伴有眼睑或球结膜水肿。
眼眶横纹肌肉瘤(orbital rhabdomyosarcoma)发生年龄较为广泛,自出生至成年人均可发现,但多见于10岁以下的儿童,平均年龄7至8岁,是儿童时期最常见的眶内恶性肿瘤。恶性程度高,发展快,早期即可有血行转移,预后不良,得不到及时治疗,多于一年内死亡。
根据主要细胞成分可分为不同类型:胚胎型(embryonal),腺泡型(alveolar)和多形性(pleomorphic)。3/4眼眶内横纹肌肉瘤属于胚胎型,多形性一般见于成年人,最为少见。
目前临床上仍采取手术切除为主,辅以大剂量放、化疗的综合性治疗方法。但此方法副反应较大,仍有较高的复发率。因此,如何采取有效的治疗措施以改善预后具有极重要的意义。
反义治疗眼眶横纹肌肉瘤的优点
近二十几年来反义治疗成为研究热点,是指应用与目的基因mRNA互补的核酸,使之在基因复制、转录、剪接、mRNA转运及翻译等多个水平上抑制目的基因表达从而抑制疾病的发展的一种治疗方法,反义核酸主要有反义RNA、反义寡脱氧核苷酸(ASODN)及核酶。反义寡核苷酸即为人工合成的长度为10-30个碱基的DNA分子及其类似物,通过Watson -Crick碱基配对,与靶基因mRNA上的特定序列杂交,从而抑制蛋白质的表达。应用反义技术封闭眼眶横纹肌肉瘤c-FLIP蛋白表达而达到基因治疗的目的,与常规方法相比,具有设计相对简便、特异性强,靶向明确,对正常组织影响小等优点。
纳米粒(Nanoparticles,NP),成为研究的热点
然而未经包裹修饰的单纯ASODN片段稳定性及生物膜的通透性差,应用受到限制。因此,选择安全有效的导入载体成为这项基因治疗技术开展的关键。近年来,纳米粒(Nanoparticles,NP),成为研究的热点。其稳定性远好于脂质体,且克服了病毒载体的生物毒性,原料来源广泛,有较高的基因转染率,经过纳米材料包裹,可对ASODN起到保护和控释作用。在各种可作为传递ASODN的纳米粒载体中,聚乳酸-聚羟乙酸(Poly D,L-lactic-co -glycolic acid,PLGA),是经过美国FDA批准应用于临床的高分子聚合体,是良好的基因载体。李拥军等应用PLGA纳米化后包载反义单核细胞趋化蛋白-1基因,体外转染平滑肌细胞,成功将外源基因带入细胞中发挥作用。Cohen等人在动物体内也成功应用PLGA纳米粒将外源基因导入细胞中持续表达。
c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒治疗眼眶横纹肌肉瘤
有关研究人员在探讨c-FLIP在眼眶横纹肌肉瘤上表达基础上,采用反义技术与纳米技术相结合的方法制备出c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒,来下调c-FLIP的表达水平和减少c-FLIP抑制凋亡受体下游的凋亡信号转导的作用,从而逆转肿瘤表达c-FLIP逃避机体免疫监视的机制,达到抑制肿瘤生长的作用。研究分别进行了体内和体外实验,成功制备出c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒,作用效果好,性质稳定。
体外研究结果显示:c-FLIP在人胚胎型横纹肌肉瘤细胞株RD及眼眶横纹肌肉瘤手术标本中高度表达;应用c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒转染RD后,c-FLIP表达量下降,细胞调亡增多。采用细胞接种与组织块接种相结合的方法成功制备出人眼眶横纹肌肉瘤动物模型,为后期的体内实验研究奠定了基础。体内实验结果显示c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒具有明显的肿瘤抑制作用,c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒组肿瘤体积明显较其他两组小,肿瘤受到明显抑制。体外实验的成功为临床实验在药物剂量和注射途径上作了有益的探索。
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